精子DNA碎片染色试剂盒（SCD染色法）

·产品说明：

　　【品 名】

　　精子权威五联检：精子DNA碎片染色试剂盒(SCD染色法)

　　【试剂特点】无须特殊仪器，简单、快速、准确。

　　【检验原理】

　　将待测精液标本混匀于凝胶中，通过酸变性使精子头部完整的双链DNA变性为单链DNA，DNA完整的精子在经过变性和去核蛋白后经染色可扩散形成特征性的光晕，而DNA不完整的精子不会产生这种特征性的光晕。医生根据显微镜观察光晕的有无和大小判断精子的DNA完整程度。DNA完整程度指标可作为不育、反复流产以及胚胎异常病因学诊断的一种可靠的精子质量评价参照指标。

　　【样本要求】液化后的新鲜精液或贮存于-20℃的精液标本。

　　【操作方法】

　　1、将易熔凝胶管置80℃孵育20min，待完全溶化后，将易熔凝胶管转移至37℃恒温水浴箱中孵育备用。(将80℃转移到37℃需至少平衡5min方可使用)

　　2、取100ul液化精液标本与200—300ul稀释液充分混匀，再从中取50ul处理过的精液加入易熔凝胶管中充分混匀，置37℃孵育备用。

　　3、吸取30ul上述配置的精子凝胶混合液，滴在包被载玻片上，立即盖上盖玻片，在4℃下放置5 min。

　　4、以“侧抽”的方式小心移除盖玻片，在室温条件下滴加1—2ml变性液变性7 min后，弃去变性液。滴加1—2ml裂解液反应20min。

　　5、载玻片水平放置于纯化水中3—5 min，其间换水1—2次。

　　6、将载玻片分别置于70%、90%和100%的乙醇中脱水2 min，取出，空气自然干燥。

　　7、加入染色液A 10滴，放置1-2min，再缓慢加染色液B 20滴，以吸耳球吹打混匀染液，染色15min后，用流水缓缓冲洗，自然干燥或吹干，在普通光镜下观察结果。

　　注意：所有操作过程中，均要求载玻片处于水平状态。

　　【染色结果】

　　DNA完整无碎片的精子形成大和中光晕；DNA断裂为碎片的精子形成小和无光晕；DNA不完整的精子不会产生光晕。

　　见下图：图①为精子DNA碎片判定标准，其中A为精子头部最小直径，B为单侧光晕厚度，当B≤A(即光晕太小或无光晕)则表明精子存在DNA碎片。②③为DNA完整的精子，④⑤为存在DNA碎片的精子。

　　【注意事项】

　　1、操作过程对实验条件要求较高，各个环节需准确控制。

　　2、检测样本为液化后的新鲜精液或贮存于-20℃的精液标本，过期或未按贮存要求存放的标本不能用于检测。

　　3、精液中圆形的各类细胞经过变性后，形态变化较大，须注意与精子相鉴别，不要将其计入精子之列。

　　4、每次试剂使用后，请迅速盖好密封保存，以免挥发及影响效果。

　　5、使用前应详细阅读使用说明书及产品包装标识，在有效期内使用，并做好个人卫生防护，若变性液与裂解液不慎与皮肤接触或溅入眼睛，立即用大量清水冲洗并及时诊治。

　　6、生产批号、有效期见外包装。

　　7、染色废液、废瓶或使用后标本按医疗废弃物处理。

　　【基本信息】

　　存储条件及有效期：试剂盒于2-8℃避光保存，有效期12个月。

• 联系方式
• 生产企业：

  三明市和众生物技术有限公司

• 联 系 人：陈先生
• 联系电话：0598-8297899
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