增强型无血清细胞冻存液

推荐理由：

• 适用于哺乳动物细胞的冻存，细胞复苏后回收率高，可保持高活性及快速增殖能力，不影响细胞功能；

• 操作简单，无需程序降温，可直接冻存于-80℃冰箱，长期保存；

• 成分明确，不含动物源成分，安全性高；

• 即用即取，无需配制；

• 质量稳定可靠，批间次差异小；

型号和规格

LC1602（100ml/瓶），瓶口密封包装。

用途

用于-80℃、-196℃冷冻保存原代细胞和干细胞，不含任何动物源成分。

性状

含 10%DMSO，比 LC1601 增加了蛋白质冷冻保护剂。本品为淡黄色澄清溶液，有粘性。无细菌、真菌、支原体，pH=7.2~7.8, 内毒素< 1 EU/ml。

运输和储存

2~8℃低温储存和运输。可分装后于-20℃冷冻保存，使用前解冻并充分混匀。本品自生产日期起，两年内有效。

使用方法

准备细胞

1. 检查并确认细胞没有真菌、细菌、支原体污染。

2. 冻存前的细胞处于增殖旺盛的对数生长期最佳。

3. 计数待冻存的细胞数量。悬浮细胞应 180g 离心 5~10min 后除去培养基，贴壁细胞应消化后计数，再 180g 离心除去培养基以获得细胞沉淀。

细胞冻存

4. 首先确定细胞适宜的冻存密度和体积，计算应使用的LC1602 冻存液体积。

注：可使用的冻存密度为 1~10×106/ml，推荐原代细胞和干细胞冻存密度为 2~5×106/ml。冻存体积为0.5~1ml/管。

5. 吸取适量 LC1602 重悬细胞，使用前产品应当 2~8℃预冷。细胞重悬后应当立即分装至细胞冻存管。

6. 经冻存液重悬后的细胞不能在室温或 2~8℃静置超过 10 min 以上，应当尽快将冻存管移入-80℃低温冰箱，不采取任何程序降温措施或使用程序降温装置。如果无法立即移入-80℃低温冰箱，至少应当先移入低于 0℃环境中（如-20℃冰箱）短暂存放 10 min 左右， 同样不采取程序降温。

7. -80℃冰箱过夜后的冻存管，若长期储存，可移入液氮罐中保存。若短期取用，可于-80℃短期保存数月，保存时间、效果因细胞类型而不同。

注：1.初次使用本产品冻存的细胞类型，应测试保存时间和效果后再使用。

2.参考——C3A 使用LC1601 冻存液，以 1×106/ml/管于-80℃保存 12 个月后复苏，即时活率>90%。

细胞复苏

8. 先准备室温或 37℃预温好的完全培养基，其体积为冻存液体积的 9 倍。

9. 取出液氮或-80℃中的冻存管，置于 37℃水浴并不断轻摇。待剩余 1 粒米大小的冰块时， 迅速移出水浴。

10. 立即吸取冻存液至完全培养基中，轻柔吹打 3~5 次混匀。然后，180g 离心 5~10 分钟， 获得细胞沉淀备用。

安全性说明

本产品可用于科学研究，将可用于体外诊断（申请体外诊断试剂生产备案中）。尚未经过临床验证，不可用于治疗用途。